产品背景
蛋白纯化是现今研究蛋白性能、结构实验中一个关键的步骤,而纯化的第一步就是需要对大肠杆菌进行裂解,将蛋白从细胞内释放至上清中,常见的大肠杆菌裂解方法有两大类:
· 物理方法,如超声、均质法、研磨、冻融等。其优势在于不引入杂质成份、成本低、效率高。
· 化学方法,如有机溶剂法、酸碱裂菌法、溶菌酶法。化学方法的优势在于不受体积的限制,可以处理微升至升级别样品。
两类方法的对比如下:
| 裂菌方法 | 优势 | 劣势 | 适用范围 | |
| 物理方法 | 超声裂解 | 操作简便,液量损失少 | 裂解体积受限,难以处理大量样品。设备成本高。易引起温度的剧烈上升,使蛋白失活。 | 实验室小批量破菌。 |
| 高压匀浆 | 处理通量大 | 不适合处理少量、多种样品,设备成本高, | 工业大批量破菌 | |
| 反复冻融法 | 操作简单 | 破碎效率低,影响蛋白活性。 | 实验室小批量破菌 | |
| 化学方法 | 有机溶剂法 | 操作简单,不受体积的限制 | 易造成蛋白的失活。 | 特定使用方向 |
| 酸碱裂菌法 | 高效,快速,不受体积的限制 | 条件剧烈,不适合维持蛋白的天然构象 | 质粒抽提 | |
| 溶菌酶消化法 | 高效,快速,不受体积的限制 | 试剂价格不占优势、特定蛋白标签可能无法使用 | 实验室,工业 | |


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