干货分享|Pull Down试剂盒常见问题解答

 

常见问题 问题解答
说明书中标注的规格,是填料含量还是总体积? 填料跟保护液的体积比各占50%。填料是在保护液里的,保护液和填料的比例是1:1,说明书中标注的,以5T为例,写的是0.15ml,这个0.15是填料的体积,但实际到手的是0.3ml的试剂。
试剂盒中的4FF试剂,用了两三次,就吸不上来了,没法摇匀 填料被吸干了,可能在用之前没有进行混匀,可以加适量填料保护液(PBS+20%乙醇。) 静置一晚上观察填料占总溶液的百分比,根据填料体积和保护液体积比为1:1加入适量的体积的填料。
表达的蛋白裂解完,可以直接用上清去做pull down吗? 是的,可以不做纯化,去做pull down 的。
阴性对照怎么设置? 填料+与目的蛋白不结合的诱饵蛋白+目的蛋白

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